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高速逆流色譜儀
 
 
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高速逆流色譜技術簡介

高速逆流色譜 ( high-speed countercurrent chromatography , HSCCC )是 20 世紀 80 年代發展起來的一種連續高效的液—液分配色譜分離技術, 它不用任何固態的支撐物或載體。 它利用兩相溶劑體系在高速旋轉的螺旋管內建立起一種特殊的單向性流體動力學平衡,當其中一相作為固定相,另一相作為流動相,在連續洗脫的過程中能保留大量固定相。

由于不需要固體支撐體,物質的分離依據其在兩相中分配系數的不同而實現,因而避免了因不可逆吸附而引起的樣品損失、失活、變性等,不僅使樣品能夠全部回收,回收的樣品更能反映其本來的特性,特別適合于天然生物活性成分的分離。而且由于被分離物質與液態固定相之間能夠充分接觸,使得樣品的制備量大大提高,是一種理想的制備分離手段。

它相對于傳統的固—液柱色譜技術,具有適用范圍廣、操作靈活、高效、快速、制備量大、費用低等優點。目前 HSCCC 技術正在發展成為一種備受關注的新型分離純化技術,已經廣泛應用于生物醫藥、天然產物、食品和化妝品等領域, 特別在天然產物行業中已被認為是一種有效的新型分離技 術;適合于中小分子類物質的分離純化。

  我國是繼美國、日本之后最早開展逆流色譜應用的國家,俄羅斯、法國、英國、瑞士等國也都開展了此項研究。美國 FDA 及世界衛生組織( WHO )都引用此項技術作為抗生素成分的分離檢定, 90 年代以來,高速逆流色譜被廣泛地應用于天然藥物成分的分離制備和分析檢定中。

逆流色譜原理:

1. 逆流色譜是20世紀50年代源于多極萃取技術(非連續性)

但是多極萃取設備龐大復雜、易碎、溶劑體系容易乳化,溶劑耗量大,分離時間長。

2. 20世紀70年代,出現了液滴逆流色譜(DCCC)

特點:(1)流體靜力學原理(Hydrostatic equilibrium system,HSES)
  ?。?)分離時間過長、連接處容易出現滲漏等

3.20世紀70年代出現了離心分配色譜儀(Centrifugal partition chromatography,CPC)


特點: (1)基于流體靜力學原理(Hydrostatic equilibrium system,HSES),利用公轉產生的單一力場
  ?。?) 連接處較多而且容易出現滲漏,清洗維護復雜

4.20世紀80年開始出現了現在的高速逆流色譜,可稱為最先進的逆流色譜
特點:(1) 基于流體動力學原理(Hydrodynamic equilibrium system,HDES)


  (2) 通過公轉、自轉(同步行星式運動)產生的二維力場,保留兩相中的其中一相作為固定相


(3)通過高速旋轉提高兩相溶劑的萃取頻率,1000rpm旋轉時可達到17次/s頻率的萃取過程。

5.HSCCC分離流程圖

應用領域:  

( 1 )天然產物已知有效成分的分離純化
( 2 )化學合成物質的分離純化
( 3 )中藥一類、五類新藥的開發
( 4 )中藥指紋圖譜和質量控制研究
( 5 )抗生素的分離純化
( 6 )天然產物未知有效成分的分離純化(新化合物開發)
( 7 )海洋生物活性成分的分離純化
( 8 )放射性同位素分離
( 9 )多肽和蛋白質等生物大分子分離以及手性分離等

 

 

 
   
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